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食鹽直接結晶法

在蛋清中加入一定量的碘化物或碳酸鹽等鹽類(lèi)，并調pH值至9.5—10.0，溶菌酶會(huì )以結晶形式慢慢析出，而大多數蛋白質(zhì)仍然在溶液。在超濾濃縮脫鹽后，為獲得較純產(chǎn)品，采用結晶純化酶液經(jīng)超濾處理后，用NaOH調整pH 9.5，離心去除。上清液在緩緩攪拌下，加NaCl至5%，靜置一周，得粗結晶。結晶溶于pH 4.6醋酸水中，分去不溶物后，進(jìn)行重結晶，結晶的最終得率為60%左右。即每公斤蛋清中可得重結晶品近1.3 g，活力測定為8000U/mg。

聚丙烯酸沉淀法

聚丙烯酸沉淀法為將提取過(guò)濾后含酶洗脫液，首先經(jīng)過(guò)吸附步驟，即將過(guò)濾后的澄清溶液用20%的NaOH溶液調pH至6.0，在調pH值的過(guò)程中不停的攪拌。有少量的乳白色沉淀析出，然后加入15%聚丙烯酸，立即有白色沉淀析出，加至pH值為3.0為止，靜置17個(gè)小時(shí)進(jìn)行靜析，得到粘附于底部的乳白色膠狀物。第二步解離，將前步得到的溶菌酶聚丙烯酸凝聚物。加入少量蒸餾水并用0.5 mol/L的碳酸鈉，將其溶解，轉移后，將pH值調到9.5。加入5%CaCl2溶液將溶菌酶聚丙烯酸解離，至無(wú)沉淀析出，然后過(guò)濾，得到澄清溶液。第三步鹽析，將所得澄清溶液加入5%的NaCI溶液攪拌均勻。放入冰箱調溫度為0℃。待有晶體析出后，用無(wú)水乙醇洗滌數次，置恒溫培養箱中40℃條件下干燥稱(chēng)重。